基于有效组分检测与理化表征相结合的当归补血汤制备工艺与质量控制研究

目的 优选当归补血汤的制备工艺,探索以理化表征参数作为汤剂制备工艺评价与质量控制手段的可行性。方法 采用正交试验设计,主要以有效组分阿魏酸、黄芪甲苷、黄芪皂苷、多糖的量为指标,全面考察当归补血汤的制备工艺,并对所得提取液进行流变学、表面化学、电化学等方面的表征,将表征参数与组分的量进行多项式回归分析。结果 优选的当归补血汤制备工艺条件为取处方药材加12倍量水,提取3次,每次1.0 h;理化表征显示,不同制备工艺条件所得汤剂理化参数差别较大,且渗透压与体系组分的量关系最为密切,表面张力、电导率次之,而pH值、黏度与体系组分的量关系不密切。结论 初步表明,表面张力、电导率和渗透压可作为当归补血汤制备工艺与质量控制的评价指标,通过提取液的理化表征来进行质量控制具有一定的可行性。     

Material Base of in vivo Invigorating Qi and Enriching Blood of Bazhen Decoction by HPLC-ESI-MS

Objective To identify the in vivo metabolized chemical constituents in Bazhen Decoction (BZD) and to study the relationship between Siwu Decoction (SWD) and Sijunzi Decoction (SJZD) with BZD. Methods Analysis and comparison were carried out by HPLC-ESI-MS. Serum samples after ig administration of preparations such as SWD, SJZD, and BZD, with different ingredients were collected for analysis. Results Twenty-two components were detected after ig administration of BZD, and six of them were metabolites and others were original form of the components contained in BZD. The prototype constituents were atractylenolide I, 5-hydroxymethyl-furoic acid (5-HMFA), oxypaeoniflorin, atractylenolide III, albiflorin, paeoniflorin, liquiritin, ferulic acid, ligustilide, and ginsenosides Rg1 and Rb1. The metabolized constituents were paeonimetabolin I, glycyrrhetic acid mono- glucuronide, glycyrrhetinic acid, and ginsenosides Rh1 and Rd. Conclusion The results also show that 5-HMFA, oxypaeoniflorin, albiflorin, paeoniflorin, ferulic acid, and ligustilide are common components absorbed into blood existing in both BZD and SWD, which are material base of enriching blood; Atractylenolide I, atractylenolide III, and liquiritin are common ingredients absorbed into blood existing in both BZD and SJZD, and they are material base of invigorating Qi. The results provide basic data for the further studies on the effective components, the effecting mechanism, and the quality control of BZD.     

HPLC-QTOF/MS法鉴定甘草泻心汤中化学成分

目的 对甘草泻心汤中化学成分进行鉴定。方法 对甘草泻心汤、单味药汤剂和混合对照品进行HPLC分析。采用Agela venusil MP C₁₈（2）色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相：0.2%甲酸水溶液–乙腈,梯度洗脱,检测波长265、327 nm,体积流量1.0 mL/min,柱温25℃,进样量10 μL。液路采用三通分流0.2 mL/min进入ESI源,在正、负离子模式下进行质谱检测。采用甲酸钠溶液作为内参校准液每针校正。根据对照品、文献报道和数据库数据推测鉴定相关色谱峰的化合物和单味药来源。结果 提取出85个基峰离子,根据元素分析推测出其化学式,其中80个推测出了可能的化合物结构信息,采用对照品确证了6个成分,其中归属于甘草、黄芩、大枣、黄连、干姜、半夏分别为40、31、13、11、5、1个成分。结论 HPLC-QTOF/MS作为一种高选择性、高分离度、高灵敏度的分析手段能有效地鉴定甘草泻心汤中化学成分。     

下瘀血汤干预肝硬化大鼠的蛋白质组学研究

目的 基于肝组织差异蛋白质组表达,解析下瘀血汤对硫代乙酰胺诱导的肝硬化进展期大鼠的作用及其机制。方法 48只SD雄性大鼠中的18只作为对照组,其余30只ip给予40 mg/mL的硫代乙酰胺水溶液200 mg/kg制备大鼠肝硬化模型,每周2次,连续8周;于开始造模后第4周分别随机处死对照组和造模大鼠各6只,进行药物干预前的动态观察。其余模型大鼠于开始造模后第5周首日随机分为模型组及下瘀血汤组,下瘀血汤组大鼠ig给予下瘀血汤0.626 g/kg,对照组和模型组大鼠ig生理盐水;于第8周末处死大鼠,双向凝胶电泳分离肝组织总蛋白,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱分析鉴定部分差异表达蛋白;蛋白质免疫印迹法检测层粘连蛋白受体（67 LR）、DJ-1蛋白、Cu-Zn超氧化物歧化酶（Cu-Zn SOD）蛋白表达。结果 鉴定的18个蛋白中有5个氧化应激蛋白、5个与物质代谢相关的蛋白、4个细胞骨架蛋白、2个与炎症反应相关的蛋白、2个与增殖凋亡相关的蛋白;验证的3个蛋白点（67 LR、Cu-Zn SOD、DJ-1）与双向电泳分析结果基本一致。结论 过氧化损伤以及造成的物质代谢异常是硫代乙酰胺致大鼠肝硬化的重要病理环节,提高机体内在的抗氧化能力及逐步恢复物质代谢能力是下瘀血汤逆转大鼠肝硬化的主要机制之一。     

消瘅汤治疗糖耐量降低32例临床疗效观察

目的观察消瘅汤治疗糖耐量减低（IGT）的临床疗效。方法将62例IGT患者随机分为治疗组（32例）和对照组（30例）。两组患者均给予一般的饮食及运动干预治疗,在此常规治疗的基础上对照组患者采用维生素B1治疗;治疗组采用消瘅汤治疗。观察两组患者治疗后临床疗效及治疗前后体重指数（BMI）、血糖、胰岛素、血脂、血压、胰岛素敏感指数（IAI）等指标的变化情况。结果两组患者治疗后,对照组总有效率为43.3%,治疗组为87.5%,两组比较有显著性差异（P〈0.01）。治疗组治疗后血糖、胰岛素、IAI、血脂（除高密度脂蛋白）及血压情况与对照组比较,有显著性差异（P〈0.05）。结论消瘅汤能明显增加胰岛素敏感性,可逆转糖耐量减低,对机体进行多方面综合调节,且无明显毒副作用,值得进一步推广。     

助运除满汤对功能性消化不良（FD）大鼠模型部分免疫功能的影响

目的：探讨助运除满汤治疗功能性消化不良（FD）的免疫学机理。方法：将60只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、助运除满汤低剂量组（低剂量组）、助运除满汤中剂量组（中剂量组）、助运除满汤高剂量组（高剂量组）及半夏泻心汤组6组,每组10只。除空白对照组外余均用夹尾刺激法制作FD动物模型。造模成功后,各组给予相应药物治疗。连续用药14天后,分别检测各组大鼠脾脏指数、胸腺指数及血清IL-2的含量。结果：模型组与空白对照组相比．脾脏指数、胸腺指数及血清IL-2含量均显著下降（P〈0．05）;与模型组相比,半夏泻心汤组、中剂量组脾脏指数显著升高（P〈0．05）;对大鼠血清IL-2含量的影响：与模型组大鼠相比,中、高剂量组及半夏泻心汤组大鼠血清IL-2含量显著升高（P〈0．05）;中、高剂量组比半夏泻心汤组大鼠血清IL-2含量升高更显著（P〈0．05）。结论：助运除满汤增强机体免疫功能的作用主要是增强机体体液免疫,而对细胞免疫的影响不明显。     

温阳活血方防治冠心病PCI术后再狭窄的临床研究

目的：研究温阳活血方（WHO）防治冠心病介入术（PCI）后再狭窄的临床疗效。方法：将进行PCI术成功的50例阳虚血瘀证冠心病患者随机分为治疗组（25例）和对照组（25例）,对照组常规西药治疗,治疗组在此基础上服用温阳活血方,疗程为3个月。对患者在治疗前及治疗后1周、2周、3周、4周及12周后进行心绞痛、血瘀证、胸痹证候量化评分及证候疗效评定。结果：治疗组的心绞痛、血瘀证、中医胸痹证候的改善程度以及对心血管事件的预防优于对照组;两组患者的血脂情况均有改善,但组间比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：温阳活血方对防治PCI术后再狭窄具有一定疗效。     

温中健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠下丘脑及结肠黏膜5-HT表达的影响

目的：观察温中健脾方对腹泻型肠易激综合征（D-IBS）大鼠下丘脑和结肠黏膜5-羟色胺（5-HT）表达的影响。方法：48只雄性Wistar大鼠依体重匹配分为正常组、模型组、中药组（温中健脾方组）和西药组（得舒特组）,每组12只。用番泻叶联合束缚应激刺激复制D-IBS模型。造模2周后给予药物干预,共14d。治疗结束后处死动物,取下丘脑及结肠黏膜进行免疫组化染色,应用医学图像定量分析系统进行免疫组化图像分析。结果：模型组、中药组及西药组下丘脑和结肠黏膜内5-HT的PA值、OD值及IHC-I较正常组明显升高（P〈0．05,P〈0．01）;经药物干预后,中药组和西药组上述各指标均较模型组明显降低（P〈0．05,P〈0．01）;中药组与西药组比较,除下丘脑5-HT的PA值未见明显差异外,其余指标西药组下降尤为显著（P〈0．05,P〈0．01）。结论：温中健脾方能降低D-IBS模型大鼠下丘脑及结肠黏膜5-HT的表达,调控脑-肠轴以治疗D-IBS。     

增效安神止颤2号方对帕金森病运动与非运动症状疗效评价

目的：评价增效安神止颤2号方（ZAZ2）对帕金森病PD运动与非运动症状的疗效。方法：102名帕金森病患者随机、双盲分为ZAZ2组（n=65）与安慰剂组（n=37）。在服药前、服药1周以及服药13周后,分别使用帕金森病统一评分量表（UPDRS）积分、帕金森病次要症状量表以及解析加速度记录仪对两组患者的疗效进行评估和比较。结果：与安慰剂组比较,ZAZ2组UPDRS Part Ⅳ积分、非运动症状量表积分以及夜间的平均活动量得到了明显改善,而且其体现身体内在活动能力的幂型自相关指数α也有改善。结论：ZAZ2能够改善PD患者的运动与非运动症状,使患者获益;优化混乱碎片分析方法可作为评估帕金森病临床疗效的敏感、有效手段。     

龟鹿二仙胶汤含药血清对兔骨髓基质干细胞增殖的影响

目的：观察龟鹿二仙胶汤对骨髓基质干细胞（BMSCs）增殖的影响,确定影响BMSCs增殖的最佳中药血清浓度。方法：经前期体外分离、纯化、培养获得兔BMSCs,运用不同浓度的龟鹿二仙胶汤中药含药血清对获得的兔BMSCs进行药物干预24、48、72h后,采用MTT、免疫组化、流式细胞仪等方法,研究龟鹿二仙胶汤对BMSCs增殖的影响。结果：MTT比色实验显示,龟鹿二仙胶各浓度组均能不同程度地促进BMSCs的能量代谢,促进BMSCs增殖,与空白对照组相比有显著差异（P〈0．01）,而且以15倍药物浓度组为最佳。免疫组化结果证实,龟鹿二仙胶汤含药血清可通过促进PCNA表达来控制DNA复制,以15倍龟鹿二仙胶汤药物浓度血清培养时BMSCs表达致密的棕褐色颗粒最多,其他浓度组及TGF—β3组较多,空白对照组则最少。FCM结果显示,二仙胶汤药物血清能显著提高BMSCs增殖指数,且以15倍药物浓度龟鹿血清培养时最明显。结论：龟鹿二仙胶汤刺激BMSCs增值与药物浓度有关,低浓度龟鹿二仙胶汤就能显著刺激BMSCs增殖,无论是48h、72h测验均为15倍药物浓度时具有显著的增值作用,而更高浓度龟鹿二仙胶汤则表现为促进BMSCs增殖作用减弱。